一、实验原理

近年来，聚丙烯酰胺脲梯度电泳成为研究蛋白质去折叠与再折叠的非常重要的实验技术之一。脲梯度电泳的基本原理是在常规的聚丙烯酰胺凝胶中加入非离子型变性剂-尿素，使其形成脲浓度梯度。

电泳时将脲梯度置于垂直电泳方向，使同一蛋白质样品在连续变化的不同浓度的脲环境中电泳，蛋白质分子随脲浓度变化而发生的结构状态的变化，因而表现出不同的迁移率，终在显色后的凝胶中呈现出反映蛋白质构象变化的二维图像。

二、实验用品

  （一）器材

（1）Bio-Rad公司垂直板型电泳装置。

（2）蠕动泵。

（3）梯度混合器、电磁搅拌器及电磁搅拌子。

（4）1ml 和100µL微量进样器，注胶用的细长针管。

（二）试剂  

（1）电极缓冲液的选择：缓冲液的选择取决于样品蛋白质的性质，如等电点、溶解度、稳定性和实验目的等。