由于 ADF法和NDF法不能测定食品中的可溶性膳食纤维含量，人们根据Trowell等对膳食纤维的定义模仿食物在消化道的消化过程提出了酶法分析。样品分别利用α-淀粉酶、蛋白酶和葡萄糖苷酶进行酶解消化，除去蛋白质和淀粉。在ASP和Prosky等来自29个国家43个实验室的学者的共同努力下，提出了比较完整的酶 - 重量法，并被 AOAC、AACC 等机构采纳为AOAC 法和 AACC 法并进一步成为 F D A 和 WHO/FAO等承认的通用方法。

该方法的zui大优点在于能同时分析出样品中可溶性与不溶性膳食纤维的含量，且分析设备少。但过程比较复杂，影响因素多，操作不方便且成本高，后又被Lee&Prosky等改良成为操作比较简单的方法，该方法被推荐为 AOAC/AACC 共同的分析测定方法。酶法分析膳食纤维除酶重量法外，比较常用的还有以Englyst法和Uppsala为主的酶一化学法。

该法是用淀粉酶除去淀粉，再用酸把膳食纤维水解成单糖，然后用比色法、GLC 或 HPLC 测定单糖组成和含量，该法能快速、准确地测定总膳食纤维、可溶性膳食纤维和不溶性膳食纤维，并能确定组成膳食纤维的单糖成分，为分析不同膳食纤维生理功能提供了有效的手段。但是，该法是建立在把膳食纤维定义为非淀粉多糖的基础上，因而不能测定木质素、多酚化合物、纤维醇等膳食纤维，所以该法只在英国等少数欧盟国家使用并逐渐被酶一重量法代替。