一、实验原理

生物膜的研究发展迅速，要研究生物膜的组成、结构及功能，首先必须分离出纯净的细胞膜。

分离状态下的哺乳动物的红细胞膜，一般称为“血影”。哺乳动物的红细胞中没有通常真核生物细胞内所含有的任何细胞器，容易制备得到纯粹的细胞膜，取材方面来源也十分方便，是研究细胞膜的好材料。

从哺乳动物红细胞中分离细胞质膜，步是收集血液并置于加有抗凝剂的容器内，用低速离心的方法从血液中分离得红细胞，然后用等渗缓冲液重复洗涤多次，去除血浆。第二步，将洗净的红细胞从等渗缓冲液转移到低渗缓冲液中，由于渗透压力作用于细胞质膜，使红细胞膨胀而溶血。后一步，将溶血的红细胞经过充分反复洗涤，高速离心，去除血红蛋白和其他细胞内含物。这样制备所获得的终产品几乎全是红细胞膜。

二、实验用品

  （一）器材

（1）冰冻离心机。

（2）相差显微镜。

（二）试剂  

（1）pH7.4的等渗磷酸酸盐缓冲液

  贮液A：称取0.780g磷酸二氢钠溶于水，定容至1000ml。

  贮液B：称取3.582g磷酸氢二钠溶于水，定容于2000ml。

取380ml贮液A加1620ml贮液B，用少量浓HCL调PH至7.4，再称17.53gNACL溶于其中。

（2）PH7.4低渗Tris.HCL缓冲液：

      贮液A：称取2.42gTris，溶于水，稀释至500ml。

      贮液B：取0.84ml36%-38%HCL,稀释至500ml。

   取500ml贮液A加414ml贮液B，用水稀释至近于2000ml，用6mol/L HCL调PH室7.4，再定容至2000ml。

    （3）肝素-PH7.4等渗磷酸盐缓冲液：将肝素溶在PH7.4等渗磷酸盐酸缓冲液中，每ml含肝素500单位。

（三）材料

      哺乳动物的血液。